無(wú)菌實(shí)驗室也被稱(chēng)為潔凈室、潔凈室和潔凈室,無(wú)菌實(shí)驗室的主要功能是控制室內污染。沒(méi)有無(wú)菌實(shí)驗室,是不可能批量生產(chǎn)污染敏感的部分。無(wú)菌實(shí)驗室定義為與空氣過(guò)濾、分配和優(yōu)化、建筑材料和設備的房間,使用一個(gè)特定的程序控制空氣懸浮粒子濃度,以達到適當的粒子清潔水平。詳細的技術(shù)操作細節下面列出的各種地區和試劑。
1. 樣品制備區該地區用于樣品制備。核酸提取試劑的制備和操作應采取預防措施:1)PCR產(chǎn)品需要被放大和序列的DNA克隆不會(huì )在這個(gè)房間里工作。
2)將組織文化、組織樣本和血清樣本的樣本準備室進(jìn)行處理,根據應用需要提取DNA或RNA。
3)用于樣本處理事情不能用一般的分子克隆,序列不能作為控制目標。
4)DNA樣本應該使用特殊的保護性或正壓活塞吸管,防止氣溶膠的傳播羅氏樣本。
5)大容量樣本應使用無(wú)菌一次性吸管包裝。
6)開(kāi)放前管、離心應該簡(jiǎn)潔,減少氣溶膠的發(fā)生,和管不得破損,導致氣溶膠。
7)在任何時(shí)候穿實(shí)驗服和手套。手套應該經(jīng)常改變,尤其是在每一步的提取過(guò)程。實(shí)驗室外套應該在樣品制備室專(zhuān)門(mén)使用,并經(jīng)常清潔。無(wú)菌實(shí)驗室也被稱(chēng)為潔凈室、潔凈室和潔凈室,無(wú)菌實(shí)驗室的主要功能是控制室內污染。沒(méi)有無(wú)菌實(shí)驗室,是不可能批量生產(chǎn)污染敏感的部分。無(wú)菌實(shí)驗室定義為與空氣過(guò)濾、分配和優(yōu)化、建筑材料和設備的房間,使用一個(gè)特定的程序控制空氣懸浮粒子濃度,以達到適當的粒子清潔水平。詳細的技術(shù)操作細節下面列出的各種地區和試劑。
1. 樣品制備區該地區用于樣品制備。核酸提取試劑的制備和操作應采取預防措施:1)PCR產(chǎn)品需要被放大和序列的DNA克隆不會(huì )在這個(gè)房間里工作。
2)將組織文化、組織樣本和血清樣本的樣本準備室進(jìn)行處理,根據應用需要提取DNA或RNA。
3)用于樣本處理事情不能用一般的分子克隆,序列不能作為控制目標。
4)DNA樣本應該使用特殊的保護性或正壓活塞吸管,防止氣溶膠的傳播羅氏樣本。
5)大容量樣本應使用無(wú)菌一次性吸管包裝。
6)開(kāi)放前管、離心應該簡(jiǎn)潔,減少氣溶膠的發(fā)生,和管不得破損,導致氣溶膠。
7)在任何時(shí)候穿實(shí)驗服和手套。手套應該經(jīng)常改變,尤其是在每一步的提取過(guò)程。實(shí)驗室外套應該在樣品制備室專(zhuān)門(mén)使用,并經(jīng)常清潔。
2。 樣品制備和RNA PCR RNA PCR額外的步驟需要更多樣本操作,它增加了污染的可能性之間的樣本。為了避免這個(gè)問(wèn)題,可以進(jìn)行樣品制備領(lǐng)域的反轉錄的一步。
3。在PCR區域有一個(gè)專(zhuān)門(mén)的準備各種各樣的反應。清潔、無(wú)污染的克隆和樣品制備。PCR地區配備試劑和準備,特別是在該地區的pre PCR的特殊使用正壓活塞吸管。
4。 PCR實(shí)驗室試劑的操作1)使用的所有解決方案都應該沒(méi)有核酸和/或核酸酶(DNase和核糖核酸酶)的污染。
2)所有PCR試劑使用的水應該是高質(zhì)量的新鮮蒸餾去離子水,0。22μM過(guò)濾和高壓滅菌。
3)低于20℃到25℃存儲試劑,建議添加一些抗菌劑,如疊氮化鈉。擴增試劑和樣品制備試劑添加0。025%疊氮化鈉不抑制放大反應。
4)所有使用的試劑應該大規模生產(chǎn)。實(shí)驗試劑是否符合要求,然后打包成只夠一次使用的數量,為了存儲。
5)所有試劑的制備和樣本應當一次性消毒瓶和管的使用。
6)在準備新樣品用新試劑之前,來(lái)測試它。
7)樣品制備和PCR區域在使用吸管之前不使用時(shí)應小心保存。